HPLC分析方法


<測定準備>

01. HPLC分析機器の電源を入れる
        ポンプ LC-10ADvp A・B → 可視域検出器  SPD-M10Avp  → カラムオーブン → 
        オートインジェクター  → システムコントローラー  SCL-6B と SCL-10Avp  → パソコン

02. 廃液を捨てる

03. キャリア等を用意
        A液 1.5%H3PO4 in H2O(v/v)
        B液 1.5% H3PO4, 20%HOAc, 25%MeCN in H2O
        100% MeOH
        80%MeCN in H2O
        D.W.   
        100% IPA

 

<MeOH洗浄>

04. プランジャー・プランジャーシールの洗浄

05. ポンプ内のキャリアの置換  →MeOH

06.  MeOH 50min
        SCL-10Avp MENU1 #1 ISO. 0.5ml/min Pump A・B

07. プランジャー・プランジャーシールの洗浄

08. ポンプ内のキャリアの置換  MeOH→D.W.

09.  D.W. 20min
        SCL-10Avp MENU1 #1 ISO. 0.5ml/min Pump A・B

 

<MeCN洗浄>

10. プランジャー・プランジャーシールの洗浄

11. ポンプ内のキャリアの置換  D.W.→80%MeCN in H2O

12. 80%MeCN in H2O 50min (カラム洗浄)
        SCL-10Avp MENU1 #1 ISO. 0.5ml/min Pump A・B

13. ポンプ内のキャリアの置換  80%MeCN in H2O→D.W.

14. D.W. 20min
        SCL-10Avp MENU1 #1 ISO. 0.5ml/min Pump A・B

 

<カラム前処理>

15. ポンプ内のキャリアの置換  D.W.→A・B液

16. A・B液 100min
        SCL-10Avp MENU1 #2 ISO. 0.5ml/min Pump A・B

 

<分析準備>

17. CLASS-M10A起動

18. オートサンプラーへのサンプル設置

19. 分析タイムプログラムの設定
        SCL-10AVP MENU0 FILE#2
        SCL-6B A.INJ

 

<分析>

20. 分析
        SCL-6B START
        自動的に SCL-10Avp #0 B.GE. Bconc.20%(start)→85%(40min)→20%(45min)→STOP(50min)

 

<MeCN洗浄>

21. プランジャー・プランジャーシールの洗浄

22. ポンプ内のキャリアの置換  A・B液→D.W.

23. D.W. 20min
        SCL-10Avp MENU1 #1 ISO. 0.5ml/min Pump A・B

24.  プランジャー・プランジャーシールの洗浄

25. ポンプ内のキャリアの置換  D.W.→80%MeCN in H2O

26. 80%MeCN in H2O 50min

27. プランジャー・プランジャーシールの洗浄

28. ポンプ内のキャリアの置換  80%MeCN in H2O→D.W.

 

<MeOH洗浄>

29. D.W. 20min
        SCL-10Avp MENU1 #1 ISO. 0.5ml/min Pump A・B

30. プランジャー・プランジャーシールの洗浄

31. ポンプ内のキャリアの置換  D.W.→MeOH

32. MeOH 50min
        SCL-10Avp MENU1 #1 ISO. 0.5ml/min Pump A・B

33. プランジャー・プランジャーシールの洗浄

35. ポンプ内のキャリアの置換  MeOH→D.W. または IPA(流路洗浄時)

 

<流路洗浄>  *36.〜38.は毎月1回行うこと

36. カラムを外す

37. IPA 50〜200min (流路の洗浄)
        SCL-10Avp MENU1 #1 ISO. 0.5ml/min Pump A・B 汚れに応じて時間調節

37. プランジャー・プランジャーシールの洗浄

38. ポンプ内のキャリアの置換  IPA→D.W.

 

<次の分析への準備>

39. 15.〜繰り返し
      分析機器を停止するときは 15.ではなく04.〜06.でMeOHを50min以上流した時点で止める


簡易マニュアル          詳細マニュアル