HPLC分析方法
<測定準備>
01. HPLC分析機器の電源を入れる
ポンプ LC-10ADvp A・B → 可視域検出器 SPD-M10Avp
→ カラムオーブン →
オートインジェクター → システムコントローラー SCL-6B と SCL-10Avp
→ パソコン
02. 廃液を捨てる
03. キャリア等を用意
A液 1.5%H3PO4 in H2O(v/v)
B液 1.5% H3PO4, 20%HOAc, 25%MeCN in H2O
100% MeOH
80%MeCN in H2O
D.W.
100% IPA
<MeOH洗浄>
04. プランジャー・プランジャーシールの洗浄
05. ポンプ内のキャリアの置換 →MeOH
06. MeOH 50min
SCL-10Avp MENU1 #1 ISO. 0.5ml/min Pump A・B
07. プランジャー・プランジャーシールの洗浄
08. ポンプ内のキャリアの置換 MeOH→D.W.
09. D.W. 20min
SCL-10Avp MENU1 #1 ISO. 0.5ml/min Pump A・B
<MeCN洗浄>
10. プランジャー・プランジャーシールの洗浄
11. ポンプ内のキャリアの置換 D.W.→80%MeCN in H2O
12. 80%MeCN in H2O 50min (カラム洗浄)
SCL-10Avp MENU1 #1 ISO. 0.5ml/min Pump A・B
13. ポンプ内のキャリアの置換 80%MeCN in H2O→D.W.
14. D.W. 20min
SCL-10Avp MENU1 #1 ISO. 0.5ml/min Pump A・B
<カラム前処理>
15. ポンプ内のキャリアの置換 D.W.→A・B液
16. A・B液 100min
SCL-10Avp MENU1 #2 ISO. 0.5ml/min Pump A・B
<分析準備>
17. CLASS-M10A起動
18. オートサンプラーへのサンプル設置
19. 分析タイムプログラムの設定
SCL-10AVP MENU0 FILE#2
SCL-6B A.INJ
<分析>
20. 分析
SCL-6B START
自動的に SCL-10Avp #0 B.GE. Bconc.20%(start)→85%(40min)→20%(45min)→STOP(50min)
<MeCN洗浄>
21. プランジャー・プランジャーシールの洗浄
22. ポンプ内のキャリアの置換 A・B液→D.W.
23. D.W. 20min
SCL-10Avp MENU1 #1 ISO. 0.5ml/min Pump A・B
24. プランジャー・プランジャーシールの洗浄
25. ポンプ内のキャリアの置換 D.W.→80%MeCN in H2O
26. 80%MeCN in H2O 50min
27. プランジャー・プランジャーシールの洗浄
28. ポンプ内のキャリアの置換 80%MeCN in H2O→D.W.
<MeOH洗浄>
29. D.W. 20min
SCL-10Avp MENU1 #1 ISO. 0.5ml/min Pump A・B
30. プランジャー・プランジャーシールの洗浄
31. ポンプ内のキャリアの置換 D.W.→MeOH
32. MeOH 50min
SCL-10Avp MENU1 #1 ISO. 0.5ml/min Pump A・B
33. プランジャー・プランジャーシールの洗浄
35. ポンプ内のキャリアの置換 MeOH→D.W. または IPA(流路洗浄時)
<流路洗浄> *36.〜38.は毎月1回行うこと
36. カラムを外す
37. IPA 50〜200min (流路の洗浄)
SCL-10Avp MENU1 #1 ISO. 0.5ml/min Pump A・B 汚れに応じて時間調節
37. プランジャー・プランジャーシールの洗浄
38. ポンプ内のキャリアの置換 IPA→D.W.
<次の分析への準備>
39. 15.〜繰り返し
分析機器を停止するときは 15.ではなく04.〜06.でMeOHを50min以上流した時点で止める